在细胞培养和细胞实验室中,超纯水机的应用至关重要,主要体现在以下几个方面:
1. 细胞培养基配制
超纯水是配制细胞培养基的基础溶剂,确保无内毒素、无离子污染,避免杂质干扰细胞生长或导致实验数据偏差。例如,胎牛血清(FBS)稀释或DMEM培养基的溶解均需超纯水。
2. 试剂与缓冲液制备
PBS(磷酸盐缓冲液)、胰酶消化液等常用试剂的配制需依赖超纯水,以防止钙镁离子沉淀或微生物污染影响细胞实验的重复性。
3. 细胞清洗与传代
细胞传代或换液时,需用超纯水冲洗细胞以去除残留的培养基或消化酶,减少对细胞的机械或化学损伤。
4. 实验器皿终末漂洗
培养瓶、移液管等耗材的最终清洗需超纯水,避免普通水中的杂质附着器皿表面,进而影响细胞贴壁或增殖。
5. 特殊实验需求
干细胞培养:对水质要求极高,超纯水需通过0.22 μm滤膜过滤以确保无菌。
原代细胞分离:组织消化液的配制需超低TOC(总有机碳)超纯水,避免有机物干扰细胞活性。
6. 仪器维护
超纯水用于细胞计数仪、流式细胞仪等设备的管路冲洗,防止水垢或颗粒堵塞精密部件。
关键水质要求
电阻率:≥18.2 MΩ·cm(25°C),确保极低离子含量。
无菌性:需通过紫外灭菌或微滤膜(0.1 μm)处理。
内毒素:<0.001 EU/mL(尤其适用于免疫细胞或敏感细胞系)。
注意事项
超纯水需现制现用,长期储存可能滋生微生物或吸收二氧化碳导致pH波动。
定期校准超纯水机的电阻率和TOC监测模块,确保水质稳定。
超纯水机是细胞实验室的核心设备之一,直接关系到实验的可靠性和细胞活性。